葉綠素 a 藍(lán)綠藻分析儀主要有熒光法和分光光度法兩種檢測(cè)原理,以下是具體介紹:
熒光法
激發(fā)與發(fā)射:葉綠素 a 在特定波長(zhǎng)的光激發(fā)下會(huì)發(fā)射出特征熒光。通常使用藍(lán)光(波長(zhǎng)約 470nm)作為激發(fā)光,葉綠素 a 被激發(fā)后會(huì)發(fā)射出紅光波段(約 680nm)的熒光。
濃度關(guān)聯(lián):熒光強(qiáng)度與葉綠素 a 的濃度呈正相關(guān)關(guān)系。儀器通過(guò)檢測(cè)熒光強(qiáng)度,并經(jīng)過(guò)一系列的算法和校準(zhǔn),來(lái)推算出葉綠素 a 在水體中的濃度。
藍(lán)綠藻檢測(cè):藍(lán)綠藻含有獨(dú)-特的藻膽蛋白,如藻藍(lán)蛋白和藻紅蛋白,它們也具有各自的熒光特性。儀器可以利用這些藻膽蛋白在特定波長(zhǎng)下的熒光發(fā)射,來(lái)區(qū)分藍(lán)綠藻與其他藻類(lèi),并通過(guò)檢測(cè)特定波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度來(lái)確定藍(lán)綠藻的濃度。例如,藻藍(lán)蛋白在約 620nm 處有特征熒光發(fā)射,藻紅蛋白在約 560nm 處有特征熒光發(fā)射。通過(guò)分析不同波長(zhǎng)下的熒光信號(hào),儀器可以實(shí)現(xiàn)對(duì)藍(lán)綠藻的特異性檢測(cè),排除其他藻類(lèi)和雜質(zhì)的干擾。
分光光度法
光吸收特性:葉綠素 a 在紫外 - 可見(jiàn)光譜區(qū)有特定的吸收峰,例如在波長(zhǎng) 663nm 和 750nm 處有明顯的吸收。其中,750nm 波長(zhǎng)用于校正樣品中的濁度干擾。
濃度計(jì)算:根據(jù)朗伯 - 比爾定律,物質(zhì)在溶液中的濃度與它對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸光度成正比。儀器通過(guò)測(cè)量葉綠素 a 在特定波長(zhǎng)下的吸光度,然后利用事先建立的吸光度與濃度的關(guān)系曲線(校準(zhǔn)曲線),計(jì)算出葉綠素 a 的含量。
藍(lán)綠藻檢測(cè):對(duì)于藍(lán)綠藻的檢測(cè),分光光度法通常結(jié)合其他技術(shù)或指標(biāo)來(lái)間接實(shí)現(xiàn)。由于藍(lán)綠藻在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、色素組成等方面與其他藻類(lèi)存在差異,其吸收光譜也有一定的特征。通過(guò)分析多個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度數(shù)據(jù),或者結(jié)合熒光檢測(cè)等方法,可以對(duì)藍(lán)綠藻進(jìn)行定性或定量分析。例如,在一些研究中,會(huì)利用藍(lán)綠藻中藻膽蛋白的吸收特性,選擇特定波長(zhǎng)的吸光度比值來(lái)估算藍(lán)綠藻的生物量。
不同的葉綠素 a 藍(lán)綠藻分析儀可能會(huì)側(cè)重于不同的檢測(cè)原理,或者將多種原理相結(jié)合,以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。